七彩小球不過處理總結
1、光路不穩(wěn)定:運行小球時,圖形不好,顯微鏡看流動室,光斑偏向圓孔邊緣,調整好后運行一段時間光斑又偏離一些?!幚恚汗饴返牟环€(wěn)定往往是液路不穩(wěn)定造成的,(1)先灌注和排氣泡,把過濾器里的空氣都排一遍。(2)運行液流啟動。(3)鋼絲通樣本針,然后用cleaning當樣本高速運行5分鐘,然后用水當樣本高速運行5分鐘。
2、光路調整:液路穩(wěn)定后再調光路。通過調整光纖出來的螺絲,調光線的上下,讓光斑在孔中間,調光線的前后,讓光斑最強。光斑的左右通過調聚焦桶后面的左右螺絲。
3、調整過光線的上下后,需要運行CST的基線來校準通過不同激光的時間差。然后再運行CHENK看看結果好不好。
4、運行七彩小球不過(1)運行七彩小球和運行CST不是同一個軟件。兩個軟件不能同時和儀器通信,要一個Standby后另一個才能點Connect。
(2)七彩小球有校準補償電壓等的功能,如果調整過光路,運行七彩小球失敗可以點完成后再運行一次。(3)光路調整后,運行CST并不會對運行七彩小球起到校準作用,如果調整后運行七彩小球時檢測不到細胞數,可以移除七彩小球的電壓補償的文件,讓其重新生成。
5、運行七彩小球步驟:(1)先將運行小球的軟件Standby,然后再去運行七彩小球的軟件里點Connect。(2)七彩小球的配比,將試管拆開后,加入配套液體到刻度線處,然后避光反應15分鐘,再拿出來混勻后才可以運行。
(3)Cytometer-Setup-Standard Setup...-核對批號-Next-勾選Run setup in Manual mode-安裝試管-Next-等待完成。
6、標本正常與否:運行標本時,收集到2000個淋巴細胞就結束,正常收集的總細胞數再2萬左右。今天結束收集時,已收集200-300萬個細胞數,圖形下方有大片黑色區(qū)域。最后七彩小球通過后,標本結果就正常了。